Күзәнәк культураларын пычрату күзәнәк культурасы лабораторияләрендә иң еш очрый торган проблемага әйләнергә мөмкин, кайвакыт бик җитди нәтиҗәләргә китерә.Күзәнәк культурасын пычратучы матдәләрне ике категориягә бүлеп була, урта, сарум һәм су пычраклары кебек химик пычраткыч матдәләр, эндотоксиннар, пластилизаторлар һәм юу чаралары, һәм бактерияләр, формалар, чүпрәләр, вируслар, микоплазмалар кросс инфекциясе кебек биологик пычраткыч матдәләр.Башка күзәнәк линияләре белән пычранган.Пычратуны тулысынча бетерү мөмкин булмаса да, аның чыганагын тирәнтен аңлап һәм яхшы асептик техниканы кулланып, аның ешлыгы һәм авырлыгы кимергә мөмкин.
1.Бу бүлектә биологик пычрануның төп төрләре күрсәтелгән:
Бактерия пычрануы
Көле һәм вирус пычрануы
Микоплазма пычрануы
Чүпрә пычрануы
1.1Бактерия пычрануы
Бактерияләр - бер күзәнәкле микроорганизмнарның зур төркеме.Алар, гадәттә, диаметры берничә микрон гына, төрле өлкәләрдә булырга мөмкин, өлкәләрдән таякларга һәм спиральләргә кадәр.Аларның киң таралуы, зурлыгы, тиз үсү темплары аркасында бактерияләр, чүпрә һәм формалар белән бергә, күзәнәк культурасында иң таралган биологик пычраткыч матдәләр.
1.1.1 Бактерия пычрануын ачыклау
Бактерия белән пычрану, культураны зарарланганнан соң берничә көн эчендә визуаль тикшерү белән җиңел табыла;
Йогышлы культуралар гадәттә болытлы (ягъни турбид) булып күренәләр, кайвакыт нечкә пленка белән.
Мәдәниятнең рНында кинәт тамчылар да еш очрый.
Аз көчле микроскоп астында бактерияләр күзәнәкләр арасында кечкенә, хәрәкәтләнүче гранулалар булып күренәләр, һәм көчле микроскоп астында күзәтү аерым бактерияләрнең формаларын чишә ала.
1.2Молд һәм вирус пычрануы
1.2.1 Көлеп пычрану
Күлләр - гипа дип аталган күп күзәнәкле филаментлар формасында үсә торган гөмбә патшалыгының эукариотик микроорганизмнары.Бу күп күзәнәкле филаментларның тоташтыргыч челтәрләрендә колония яки мицелий дип аталган генетик охшаш ядрәләр бар.
Чүпрә пычрануына охшаган, культураның рН пычратуның беренче этабында тотрыклы булып кала, аннары культураның зарарлануы һәм болытлы булуы белән тиз арта.Микроскоп астында мицелий гадәттә филаментлы, кайвакыт тыгыз кластерлар кебек.Күпчелек формаларның споралары бик каты һәм кунакчыл булмаган шартларда яши алалар һәм дөрес үсеш шартлары булганда гына активлашалар.
1.2.2 Вирус белән агулану
Вируслар - микроскопик йогышлы агентлар, алар үрчү өчен төп күзәнәк техникасын үз кулларына алалар.Аларның бик кечкенә зурлыгы аларны культурада ачыклау һәм күзәнәк культурасы лабораторияләрендә кулланылган реагентлардан чыгаруны кыенлаштыра.Күпчелек вируслар хуҗаларына бик катгый таләпләр булганлыктан, алар гадәттә хуҗадан башка төрләрнең күзәнәк культурасына начар йогынты ясамыйлар.
Ләкин, вирус белән зарарланган күзәнәк культураларын куллану лаборатория персоналының сәламәтлегенә җитди куркыныч тудырырга мөмкин, бигрәк тә лабораториядә кеше яки примат күзәнәкләре үссә.
Күзәнәк культураларында вируслы инфекция электрон микроскопия, антителалар, ELISA яки PCR белән вируслы примерлар белән иммуностина ярдәмендә ачыкланырга мөмкин.
1.3 Микоплазма пычрануы
Микоплазмалар - күзәнәк стеналары булмаган гади бактерияләр, һәм алар үз-үзләрен кабатлаучы иң кечкенә организмнар дип санала.Аларның зурлыгы зур булмаганлыктан (гадәттә 1 микроннан да азрак), микоплазманы бик югары тыгызлыкка җиткәнче һәм күзәнәк культураларының начарлануына кадәр ачыклау авыр;Ул вакытка кадәр, гадәттә, инфекция билгесе юк.
1.3.1 Микоплазманың пычрануын ачыклау
Кайбер әкрен үсә торган микоплазмалар культураларда күзәнәк үлеменә китермичә торырга мөмкин, ләкин алар культуралардагы күзәнәкләрнең тәртибен һәм матдәләр алмашын үзгәртә.
Хроник микоплазма инфекциясе күзәнәкләрнең таралу темпының кимүе, туену тыгызлыгының кимүе һәм асылмалы культурада аглутинация белән характерланырга мөмкин.
Ләкин, микоплазма пычрануын ачыклау өчен бердәнбер ышанычлы ысул - флюоресцент буяу (мәсәлән, Hoechst 33258), ELISA, PCR, иммуностина, авторадиография яки микробиаль тест ярдәмендә культураны регуляр рәвештә сынау.
1.4 Чүпрә пычрануы
Чүпрәләр - гөмбә патшалыгының бер күзәнәкле эукариотлары, зурлыгы берничә микроннан (гадәттә) 40 микронга кадәр (сирәк).
1.4.1 Чүпрә пычрануын ачыклау
Бактерия белән агуланган кебек, чүпрә белән пычранган культуралар болытлы булырга мөмкин, аеруча пычрату алдынгы этапта булса.Чүпрә белән пычранган культураларның рН пычрану көчәя барганчы бик аз үзгәрә, бу этапта рН гадәттә арта.Микроскоп астында чүпрә аерым овоид яки сферик кисәкчәләр булып күренә һәм кечерәк кисәкчәләр чыгарырга мөмкин.
2.Кросс инфекциясе
Микробиаль пычрану кебек киң таралмаса да, күп күзәнәк линияләренең HeLa һәм башка тиз үсә торган күзәнәк линияләре белән киң таралуы җитди нәтиҗәләр белән ачыкланган проблема.Абруйлы кәрәзле банклардан күзәнәк линияләрен алыгыз, күзәнәк линияләренең характеристикаларын даими тикшерегез, яхшы асептик техниканы кулланыгыз.Бу практикалар сезгә пычранудан сакланырга ярдәм итәчәк.ДНК бармак эзе, кариотип һәм изотип ясау сезнең күзәнәк культурасында кросс пычрану барлыгын раслый ала.
Микробиаль пычрану кебек киң таралмаса да, күп күзәнәк линияләренең HeLa һәм башка тиз үсә торган күзәнәк линияләре белән киң таралуы җитди нәтиҗәләр белән ачыкланган проблема.Абруйлы кәрәзле банклардан күзәнәк линияләрен алыгыз, күзәнәк линияләренең характеристикаларын даими тикшерегез, яхшы асептик техниканы кулланыгыз.Бу практикалар сезгә пычранудан сакланырга ярдәм итәчәк.ДНК бармак эзе, кариотип һәм изотип ясау сезнең күзәнәк культурасында кросс пычрану барлыгын раслый ала.
Пост вакыты: 01-2023 февраль