Күзәнәк культурасының төп өстенлекләренең берсе - күзәнәк үрчү физик химиясен (ягъни температура, рН, осмотик басым, O2 һәм CO2 киеренкелеге) һәм физиологик мохит (ягъни гормон һәм туклык концентрациясе) белән идарә итү сәләте.Температурага өстәп, культура мохите үсеш чарасы белән идарә ителә.
Мәдәниятнең физиологик мохите аның физик һәм химик мохите кебек ачык булмаса да, зарар компонентларын яхшырак аңлау, таралу өчен кирәк булган үсеш факторларын ачыклау, культураның күзәнәкләренең микроэнергиясен яхшырак аңлау.(Ягъни күзәнәк-күзәнәкнең үзара бәйләнеше, газ диффузиясе, матрица белән үзара бәйләнеш) хәзер кайбер күзәнәк линияләрен серумсыз медиада культуралы итәргә мөмкинлек бирә.
1. Мәдәният мохите күзәнәк үсешенә тәэсир итә
Зинһар, күзәнәк культурасы шартлары һәр күзәнәк төре өчен төрле.
Билгеле күзәнәк тибы өчен кирәк булган культура шартларыннан читкә тайпылу нәтиҗәләре аномаль фенотипларның чагылышыннан алып күзәнәк культурасының тулысынча уңышсызлыгына кадәр.Шуңа күрә без сезне кызыксындырган күзәнәк линиясе белән танышырга һәм экспериментта кулланган һәр продукт өчен бирелгән күрсәтмәләрне төгәл үтәргә киңәш итәбез.
2. Сезнең күзәнәкләр өчен оптимальләштерелгән күзәнәк культурасы мохитен булдыру өчен саклык чаралары:
Мәдәният медиасы һәм серум (тулырак мәгълүмат өчен түбәндә карагыз)
pH һәм CO2 дәрәҗәләре (тулырак мәгълүмат өчен түбәндә карагыз)
Пластик үстерегез (тулырак мәгълүмат өчен түбәндә карагыз)
Температура (тулырак мәгълүмат өчен түбәндә карагыз)
2.1 Мәдәни медиа һәм серум
Мәдәният чарасы - культура мохитенең иң мөһим өлеше, чөнки ул күзәнәк үсеше өчен кирәк булган туклыклы матдәләр, үсеш факторлары һәм гормоннар белән тәэмин итә, һәм культураның рН һәм осмотик басымын көйли.
Беренче күзәнәк культурасы экспериментлары тукымалардан алынган экстрактлардан һәм тәндәге сыеклыклардан алынган табигый медиа ярдәмендә үткәрелсә дә, стандартлаштыру, медиа сыйфаты, ихтыяҗның артуы билгеле медиа үсешенә китерде.Массакүләм мәгълүмат чараларының өч төп төре - базаль медиа, зарарлы медиа һәм серумсыз медиа, һәм аларда зарумны тулыландыру өчен төрле таләпләр бар.
2.1.1
Gibco күзәнәк культурасы
Күпчелек күзәнәк линияләре аминокислоталар, витаминнар, органик булмаган тозлар һәм углерод чыганаклары (глюкоза кебек) булган төп медиада яхшы үсә, ләкин бу төп медиа формулалар серум белән тулыландырылырга тиеш.
2.1.2 Серумның кимүе
Gibco Түбән Серум Урта белән шешә
Күзәнәк культурасы экспериментларында зарарның тискәре йогынтысын киметү өчен тагын бер стратегия - зарарны киметүче медиа куллану.Сарумның кимүе - туклыклы матдәләргә һәм хайваннардан алынган факторларга бай төп урта формула, ул кирәкле зарар күләмен киметә ала.
2.1.3 Серумсыз урта
Gibco серумсыз уртача шешә
Серумсыз урта (SFM) зарарны тиешле туклану һәм гормон формуляцияләре белән алыштырып, хайван серумын куллануны әйләндерә.Күпчелек төп культураларда һәм күзәнәк линияләрендә серумсыз урта формуляцияләр бар, алар арасында Кытай Гамстер аналык (CHO) рекомбинант белок җитештерү линиясе, төрле гибридома күзәнәк линияләре, Sf9 һәм Sf21 бөҗәк линияләре, шулай ук вирус җитештерү өчен хуҗа өчен. .Түбәндәге таблицада серумсыз медианың өстенлекләре һәм кимчелекләре күрсәтелгән.
Өстенлек
Ачыклыкны арттыру
Күбрәк эзлекле эш
Easиңел чистарту һәм аска эшкәртү
Күзәнәк функциясен төгәл бәяләгез
Producитештерүчәнлекне арттыру
Физиологик реакцияләрне яхшырак контрольдә тоту
Кәрәзле массакүләм мәгълүмат чараларын ачыклау
Кимчелек
Күзәнәк тибындагы махсус формула таләпләре
Higherгары реагент чисталыгы кирәк
Growthсешнең акрынлыгы
2.2.1 рН дәрәҗәсе
Күпчелек нормаль имезүчеләрнең күзәнәк сызыклары pH 7.4 белән яхшы үсә, һәм төрле күзәнәк сызыклары арасындагы аермалар кечкенә.Ләкин кайбер үзгәртелгән күзәнәк линияләре бераз кислоталы мохиттә яхшырак үсүен күрсәттеләр (pH 7.0 - 7.4), ә кайбер гадәти фибробласт күзәнәк линияләре бераз эшкәртү мохитен өстен күрәләр (pH 7.4 - 7.7).Sf9 һәм Sf21 кебек бөҗәк күзәнәк линияләре pH 6.2 иң яхшы үсә.
2.2.2 CO2 дәрәҗәсе
Mediumсеш чарасы культураның рН-ны контрольдә тота һәм рН үзгәрүләренә каршы тору өчен культураның күзәнәкләрен буферлый.Гадәттә, буферлау органик (мәсәлән, HEPES) яки CO2-биарбонат нигезендәге буферлар ярдәмендә ирешелә.Уртача pH эретелгән углерод газы (CO2) һәм биарбонат (HCO3-) нечкә балансына бәйле булганлыктан, атмосфера CO2 үзгәреше уртача pH үзгәртәчәк.Шуңа күрә, CO2-биарбонат нигезендәге буфер белән буферланган урта кулланганда, экзоген CO2 кулланырга кирәк, аеруча ачык культуралы савытларда күзәнәкләр үстергәндә яки үзгәртелгән күзәнәк линияләрен югары концентрациядә культуралаганда.Күпчелек тикшерүчеләр гадәттә һавада 5-7% CO2 куллансалар да, күпчелек күзәнәк культурасы экспериментлары гадәттә 4-10% CO2 кулланалар.Шулай да, һәр pH дөрес рН һәм осмотик басымга ирешү өчен тәкъдим ителгән CO2 киеренкелеге һәм биарбонат концентрациясе бар;Күбрәк мәгълүмат алу өчен зинһар, урта җитештерүче күрсәтмәләренә мөрәҗәгать итегез.
2.3 Пластмассаны үстерү
Күзәнәк культурасы пластиклары төрле күзәнәк культурасы кушымталарына туры килер өчен төрле формаларда, зурлыкларда һәм өслекләрдә бар.Күзәнәк культурасы пластик өслек кулланмасын һәм күзәнәк культурасы контейнеры кулланмасын кулланыгыз, сезнең күзәнәк культурасы өчен дөрес пластик сайларга булышыр.
Барлык Термо Фәнни Нунк күзәнәк культурасы пластикларын карау (реклама сылтамасы)
2.4 Температура
Күзәнәк культурасы өчен оптималь температура күпчелек дәрәҗәдә күзәнәкләр изоляцияләнгән хуҗаның тән температурасына, ә температураның анатомик үзгәрүенә бәйле (мәсәлән, тире температурасы скелет мускулларына караганда түбән булырга мөмкин). ).Күзәнәк культурасы өчен, артык кызу - артык кызу.Шуңа күрә инкубатордагы температура гадәттә оптималь температурадан бераз түбәнрәк куела.
2.4.1 Төрле күзәнәк линияләре өчен оптималь температура
Күпчелек кеше һәм имезүчеләр күзәнәк линияләре оптималь үсеш өчен 36 ° C дан 37 ° C ка кадәр саклана.
Бөҗәк күзәнәкләре оптималь үсеш өчен 27 ° C температурада эшкәртелә;алар түбән температурада һәм 27 ° C белән 30 ° C арасында әкренрәк үсә.30 ° C-тан югары, бөҗәк күзәнәкләренең яшәеше кими, хәтта 27 ° C ка кайтса да, күзәнәкләр торгызылмый.
Кош күзәнәк линияләренә максималь үсеш өчен 38,5 ° C кирәк.Бу күзәнәкләр 37 ° C сакланса да, алар әкренрәк үсәчәк.
Салкын канлы хайваннардан алынган күзәнәк линияләре (амфибияләр, салкын су балыклары кебек) киң температура 15 ° C дан 26 ° C кадәр түзә ала.
Пост вакыты: 01-2023 февраль